HBI沙门氏菌生化鉴定条(GB)用于可疑沙门氏菌分离菌株的生化确认，适用于食品、农产品微生物实验室。集合多项生化反应，配合选择性平板、三糖铁琼脂预筛，完成沙门氏菌生化鉴定，操作标准化，可减少单管培养基配制工作量。
1、试验前期准备工作
(1)样品预分离筛选。按照GB4789.4完成增菌、选择性平板分离(BS、XLD、HE或沙门显色平板)，挑选至少2个可疑单菌落，接种三糖铁琼脂与营养琼脂纯化培养，经TS初判为沙门氏菌可疑株后，方可使用HBI沙门氏菌生化鉴定条(GB)试验。鉴定条本身不含TS培养基，必须提前完成纯化与初筛。
(2)耗材与菌株准备。取出鉴定条，检查包装完好，观察各孔培养基有无变色、污染；失效、破损条直接废弃。打孔器使用75%酒精擦拭消毒备用。准备无菌生理盐水、麦氏比浊管、灭菌液体石蜡、移液枪、接种针。菌株采用营养琼脂上新鲜培养菌苔，不可直接取选择性平板菌落制备菌悬液。
(3)菌悬液制备。取2mL无菌生理盐水，挑取纯化单菌落研磨混匀，制备0.5麦氏浊度均匀菌悬液，菌浓度过高或过低，都会造成生化反应假阳性、假阴性。
2、标准化接种操作
取出鉴定条，打开外盖，用消毒打孔器刺穿各孔封口膜。使用移液枪向各反应孔每孔加入100μL菌悬液。卫矛醇半固体孔采用接种针穿刺接种；赖氨酸脱羧酶、氨基酸对照孔接种完成后，添加灭菌石蜡油封液面，隔绝氧气。接种完成，在鉴定条上标记样品编号、菌株编号，盖好外盖，放入配套底托。
3.恒温培养阶段
将鉴定条放入培养箱，培养过程保持水平放置，避免孔内液体相互串流，禁止堆叠挤压。同时同步记录三糖铁琼脂的培养结果，作为综合判定依据。
4、结果判读与记录
培养期满取出HBI沙门氏菌生化鉴定条(GB)，放置配套结果记录卡对照判读。靛基质试验孔需要滴加Kovacs试剂2～3滴，观察是否出现红色环。对照各生化项目颜色变化，逐项记录阳性/阴性结果。结合三糖铁琼脂、赖氨酸、动力等结果，对照GB4789.4沙门氏菌生化特征综合判定。生化结果符合沙门氏菌典型反应，可继续开展血清学确认试验；生化反应不符，可排除或进一步复核。
5、质控、注意事项与废弃物处理
(1)质量控制。每次试验同步设置阳性对照(标准沙门菌株)、阴性对照，验证有效性。储存条件2～8℃避光保存，禁止冷冻，避免培养基失效。
(2)关键操作要点。必须使用纯化后的新鲜菌株；菌悬液浊度严格控制。赖氨酸类反应务必封石蜡油，厌氧环境缺失会直接导致结果错误。靛基质判读要在加试剂后立即观察，放置过久颜色消退，造成误判。操作全程无菌，防止交叉污染。
(3)生物安全与废弃物。试验结束所有菌液、按感染性微生物废弃物高压灭菌后处置。操作时佩戴手套，防止菌株污染。
总结：HBI沙门氏菌生化鉴定条(GB)试验流程，先选择性平板分离纯化、TS预筛可疑菌落，制备0.5麦氏菌悬液后接种鉴定条，特定孔穿刺与油封，结合配套试剂显色判读。试验核心是菌株纯化、菌悬液浓度控制、赖氨酸孔油封、靛基质即时判读，结合三糖铁结果综合判定，再配合血清凝集完成沙门氏菌确认，保证微生物检测结果符合国标实验室质控要求。
